分散酶/中性蛋白酶/Dispase II
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簡介：Dispase即為中性蛋白酶，也稱分散酶，是一種非特異性的金屬蛋白酶，用于從不同組織或器官中消化細胞外基質，釋放并制備原代單細胞；或用于細胞培養中的細胞收獲或接種轉移；也被用于防止懸浮細胞培養時的細胞意外結團。
常用的胰蛋白酶、膠原酶和鏈酶蛋白酶都屬于蛋白水解酶類，用于分散組織、分離細胞，但其對細胞傷害大，細胞在培養時不穩定，甚至引入支原體污染。Dispase不會傷害細胞膜，且因為其來源于細菌，故不會引入支原體或任何動物病毒；溫度、pH、血清成分等的差異對Dispase影響很小。Dispase經稀釋后其活性就大大降低，這也方便了后續的培養。
Dispase優點：
1. 該酶作用迅速有效又溫和；
2. 細胞能保持完整，無損細胞膜；
3. 該酶為細菌來源，不含支原體或動物病毒污染；
4. 對于溫度、pH的改變、以及血清成分都很穩定；
5. 使用螯合劑或稀釋即可簡單滅活。
酶活定義：
1U是在檢測條件下1分鐘釋放相當于1 umol酪氨酸的Folin陽性氨基酸或肽的酶量；DispaseII：≥0.8 U/mg (37度，使用酪蛋白作為底物，pH 7.5)；
抑制劑：EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金屬。血清不會抑制酶活性。
使用方法：
用Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml，使用時用細胞培養液稀釋到0.6-2.4 U/ml。不推薦高于2.4 U/ml的工作濃度，可用0.22 um的無菌濾膜過濾除菌。
保存方法：
配成溶液后，4度保存，2周內使用有效，-20度保存，2個月內使用有效，不要反復凍融；儲存液用Hepes鹽緩沖液稀釋后，4度保存，3天內使用有效。
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